ATCC菌种ATCC标准菌株的复苏

　　ATCC菌种ATCC标准菌株的复活或培养物的制备应按供应商提供的说明或按已验证的方法进行。从国内或国外菌种收藏机构获得的标准菌株经过复活并在适合的培养基中生长后，即为标准储备菌株。标准储备菌株应进行纯度和特性确认。标准储备菌株保存时，可将培养物等份悬浮于抗冷冻的培养基中，并分装于小瓶中，建议采取低温冷冻干燥，液氮贮存，超低温冷冻（低于- 0℃）等方法保存。低于-70℃或低温冷冻干燥方法可以延长菌种保存时间。标准储备菌株可用于制备每个月或每周一次转种的工作菌株。冷冻菌种一旦解冻转种制备工作菌株后，不得重新冷冻和再次使用。

　　实验室必须建立和保存其所有菌种的进出、收集、贮藏、保存、确认试验和销毁的记录（有了程序，就应当有配套的记录），应有文件化的程序管理菌种（从标准菌株到工作菌株），该程序包括：标准菌种的申购记录；从标准菌株到工作菌株操作及记录；菌种必须定期转种传代，并做纯度、特性等实验室所需关键诊断指标的确认，并记录；每支菌种都应适当标注，注明其名称、标准号、接种日期、所传代数；菌种生长的培养基和培养条件；菌种保存的位置和条件；其它需要的程序。

　　ATCC菌种ATCC标准菌株复苏：

　　1、将装有标准菌株的安瓿（bu,第四声）瓶置于平坦处，用锉刀在瓶颈划出划痕；

　　2、用含有70%酒精的药棉擦拭安瓿瓶；

　　、用无菌棉布包裹安瓿瓶后当心折断瓶颈，注意，不可用含酒精的棉布；

　　4、用无菌巴斯德吸管吸取0. 至0.5ml适合的补充液加入到安瓿瓶中；

　　5、将菌液转移到适合的培养基和培养条件下进行培养。在传代培养前，应进行纯度确认。不当的单菌落分离操作可能会感染杂菌，在活化菌株时建议同时使用液体培养的方式。

　　工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过5代（从菌种收藏机构获得的标准菌株为第0代），以防止过度的传代增加表型变化的风险。1代是指将活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养基中培养，任何亚培养的情势均被认为是转种或传代一次。必要时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。